組織病理學(xué)平臺

一、 固定
1、 固定的意義：
固定的目的是使蛋白質(zhì)等成分凝固，及時(shí)固定可使組織結構或細胞形態(tài)更接近生活狀態(tài)。同時(shí)，固定可使組織硬化成形，便于后續的包埋、切片以及染色。因此，固定是實(shí)驗室病理切片技術(shù)中非常重要的環(huán)節。
2、 固定劑選擇
固定劑種類(lèi)較多，但目前沒(méi)有通用于能使所有被固定的細胞、組織成分都達到最佳固定效果的固定劑。目前應用范圍最廣的是10%中性甲醛溶液和4%多聚甲醛。
3、 固定方法
（1） 浸泡固定
取出待檢組織浸泡于固定液中，固定液必須足量，一般是組織塊總體積的50倍，固定時(shí)間一般為48-72h，保證固定液充分滲入組織。
（2） 灌注固定
用于腦、心臟，肝、腎、肺組織標本的固定，通過(guò)體內血液循環(huán)系統對實(shí)驗動(dòng)物全是各臟器的固定。

二、 取材
由于取出的新鮮組織較柔軟，不易直接切割成實(shí)驗所需形狀。組織經(jīng)過(guò)固定，因固定劑的滲入，使蛋白質(zhì)變性凝固，形成一定的硬度而容易修整切取，此過(guò)程稱(chēng)為取材。
 
實(shí)驗所取的器官組織不可能全用于制片，要根據實(shí)驗目的，選擇性取材。對局灶性病變取材，要包含病變部位以及鄰近的正常組織區域?？傊?，取材部位要使實(shí)驗目的能在制片標本上得到完全反映。

三、 脫水
1、 脫水目的
組織經(jīng)固定后仍含有大量水分，以石蠟為包埋劑時(shí)，由于水與石蠟不能混合，應在浸蠟包埋前使用脫水劑逐步將組織中水分置換出來(lái)，這一過(guò)程稱(chēng)為脫水。
2、 脫水步驟
低濃度至高濃度乙醇依次梯度脫水，再經(jīng)歷二甲苯置換，最終浸蠟完成脫水

四、 包埋
浸蠟后的組織與熔化的石蠟在模具中冷卻固定為一定形狀的過(guò)程稱(chēng)為包埋。
 

五、 切片
組織經(jīng)石蠟包埋后，再用切片機制成切片的過(guò)程稱(chēng)為切片。
切片是制片過(guò)程中很重要的環(huán)節，優(yōu)質(zhì)切片要求組織切片薄、平整、邊緣齊，無(wú)刀痕、褶皺、龜裂等。病理切片厚度一般3-5μm，腦組織和脂肪組織稍厚，以6-8μm為宜。

六、 染色
染色是染色劑和切片組織細胞相結合的過(guò)程，目的是使組織標本各部分在光學(xué)顯微鏡下能清晰的顯示出來(lái)，觀(guān)察各組織結構和病變
分類(lèi)：
常規染色：HE染色
特殊染色：油紅O染色、天狼星紅染色、masson染色
免疫組化染色