動(dòng)物模型構建平臺

腎纖維化模型
 

1) 單側輸尿管結扎法腎小管間質(zhì)纖維化動(dòng)物模型
2) 慶大霉素誘導腎小管間質(zhì)纖維化模型
3）單側腎靜脈結扎法腎小管間質(zhì)纖維化模型

實(shí)驗方法

2.1單側腎靜脈結扎法
體重為250～300g的成年SD大鼠，經(jīng)腹腔注射5％水合氯醛麻醉，麻醉后取仰臥位固定于手術(shù)板上。動(dòng)物腹部手術(shù)區常規消毒及去毛，沿腹中線(xiàn)作手術(shù)切口，依次切開(kāi)皮膚和肌肉，游離腎臟和輸尿管，用組織鉗托起左側輸尿管中段部位，止血鉗夾住，在兩端用4-0號絲線(xiàn)分兩次結扎左側輸尿管近腎盂段，剪斷輸尿管，然后常規縫合肌肉和皮膚。術(shù)后動(dòng)物常規單籠飼養觀(guān)察，自由飲水及進(jìn)食。28d后出現纖維化。

2.2實(shí)驗步驟
體重200～260g成年SD大鼠，每天分2次經(jīng)皮下按400mg/kg體重劑量注射慶大霉素(Gentamicin,  GM)，連續2d。鏡下病理組織學(xué)觀(guān)察顯示，注射GM后第5日時(shí)腎皮質(zhì)內近曲小管上皮細胞發(fā)生廣泛性壞死，管腔內充滿(mǎn)紅色顆粒狀壞死物，可見(jiàn)蛋白管型，管壁未出現斷裂及塌陷現象，PAS染色基底膜保持完整，有少量近曲小管基底膜上開(kāi)始覆有一層扁平的上皮細胞。

 病理結果

3.1輸尿管結扎腎纖維化

HE染色可以看出造模后腎皮質(zhì)區域大量組織壞死、腎小球硬化、腎小管上皮細胞萎縮，管腔增大；天狼星紅染色顯示腎小球出現硬化，腎小管間可見(jiàn)呈現紅色的膠原纖維沉積。