江蘇省南京市棲霞區和燕路371號 東南大學(xué)國家大學(xué)科技園科創(chuàng )樓A301
大小鼠避暗實(shí)驗系統,實(shí)驗裝置分明、暗兩室。明室大小為11cm x 3.2cm。暗室較大,大小為17cm x 3 . 2ctn。兩室之間有一直徑為3cm大小的圓洞。兩室底部均鋪以銅柵。暗室底部中間位置或中后部的銅柵可以通電,電壓強度可由軟件自由控制,一般采用40V電壓。軟件通過(guò)攝像機可自動(dòng)記錄潛伏期的時(shí)間。
此法系利用鼠類(lèi)的嗜暗習性而設計的。將小鼠面部背向洞口放入明室,同時(shí)啟動(dòng)軟件。動(dòng)物穿過(guò)洞口進(jìn)入暗室受到電擊,記錄電擊次數。取出小鼠,記錄每鼠從放入明室至進(jìn)入暗室遇到電擊所需的時(shí)間,此即潛伏期。24h后重作測驗,記錄進(jìn)入暗室的動(dòng)物數、潛伏期和5 rnin內的電擊次數。
根據大量研究,小鼠平均潛伏期約十幾秒。訓練期接受一次電擊后,記憶的保持可持續1周之久。另有作者在動(dòng)物進(jìn)入暗室后,即將洞口關(guān)閉,使動(dòng)物在暗室接受一規定時(shí)間和一規定電流強度的電擊,然后取出動(dòng)物。經(jīng)此電擊的動(dòng)物,記憶的保持更為牢固。
本法優(yōu)缺點(diǎn):簡(jiǎn)便易行。反應箱越多,同時(shí)訓練的動(dòng)物數也越多。以潛伏期作為指標,動(dòng)物間的差異小于跳臺法。對記憶過(guò)程特別是對記憶再現有較高的敏感性。
避暗實(shí)驗設備
包括避暗箱、SuperShock刺激控制器和SuperPas避暗軟件。這里介紹上海欣軟信息科技有限公司生產(chǎn)的避暗箱。它包括左右兩個(gè)同等大?。?0.3cm*15.9cm*21.3cm)的隔室(compartment)。其中一隔室用一黑色布套包裹,形成暗箱(主動(dòng)回避可不用暗箱)。兩隔室之間由一個(gè)拱形門(mén)(8.9cm*11.4cm)相聯(lián),門(mén)可由實(shí)驗者根據實(shí)驗需要關(guān)上或打開(kāi)。隔室地板為不銹鋼柵欄(直徑:大鼠4.8mm,小鼠3.175mm)。暗箱一側的柵欄地板與刺激器相聯(lián),并可給予電擊;明箱一側則不與刺激器相聯(lián),故沒(méi)有電流通過(guò)。
實(shí)驗方法
小鼠穿梭被動(dòng)回避實(shí)驗(mouse step-through passive avoidance)
1.單次電擊刺激訓練
(1)將小鼠放入明箱,10s后,將明暗箱之間的門(mén)打開(kāi)。多數品系的小鼠有很強的探究行為,喜暗惡光。因此,小鼠會(huì )很快進(jìn)入暗箱。
(2)小鼠(四肢)完全進(jìn)入暗箱后,立即將中門(mén)關(guān)上,并給予一次電擊。電擊強度為能引起小鼠退縮和發(fā)聲的*小電流。根據小鼠品系不同,電流范圍為0.2~0.8mA(100V,50~60Hz AC),持續1~2s。
(3)讓小鼠在暗箱內停留10s(以使讓動(dòng)物形成箱與電擊之間的關(guān)聯(lián)),將小鼠放回籠內。清潔操作箱。進(jìn)行下一只動(dòng)物的訓練。
2.記憶保持測試(retention test) 電刺激訓練24h后,將小鼠放回明箱,中門(mén)打開(kāi),但不給電擊。
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