江蘇省南京市棲霞區和燕路371號 東南大學(xué)國家大學(xué)科技園科創(chuàng )樓A301
慢性肺阻塞模型的建立
一. 實(shí)驗方法:
方法一:LPS加煙熏造模動(dòng)物模型
香煙煙熏,每天2次,每次10根煙,每周熏6天。第1天、第15天、第29天及第43天氣管內滴注脂多糖(用量1 mg/kg)時(shí)不予煙熏,造模8周。
成功方法二:煙熏
香煙煙熏,每天2次,每次10根煙,每周熏6天。連續誘導6個(gè)月。
二. 實(shí)驗結果
2.1
HE染色顯微鏡觀(guān)察可見(jiàn)氣道上皮細胞纖毛脫落倒伏,部分出現鱗狀化生;終末小氣道管腔內較多炎性分泌物阻塞氣道;氣道管壁明顯增厚,膠原蛋白沉積增多;肺大皰和肺氣腫形成;肺泡腔內可見(jiàn)吞噬煙塵顆粒的巨噬細胞集落。
2.2
COPD組:各級支氣管黏膜上皮細胞變性、壞死、增生,纖毛倒伏、部分脫落,黏液分泌增加,杯狀細胞增多;肺實(shí)質(zhì)呼吸性支氣管及肺泡破壞、斷裂,部分融合形成肺大泡;肺間質(zhì)明顯增生,炎癥細胞廣泛浸潤。
病理評分標準:在每個(gè)視野正中心劃十字交叉線(xiàn),計算與交叉線(xiàn)相交的肺泡間隔數(Ns)和每個(gè)視野內肺泡數(Na),同時(shí)測量十字線(xiàn)總長(cháng)(L)和每個(gè)視野面積(S)。根據以下公式計算肺組織平均內襯間隔(MLI)和平均肺泡數(MAN)∶MLI=L/Ns(其數值反映肺泡平均直徑)、MAN=Na/S(其數值反映肺泡密度)。肺泡破壞指數(Destructiveindex, DI)的測定參照陳燕等[6]的方法進(jìn)行:每只小鼠取3個(gè)HE 染色切片,每張切片低倍鏡( 切片,每張切片下至少觀(guān)察20個(gè)非重復視野,分別以正常(N)或破壞(D)記錄肺泡結構的破壞情況,要求每一例各切片的N、D值總和≥總和泡結"改為3000,以公式計算DI=D/(D+N)×100。