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小鼠關(guān)節炎造模SOP

一、實(shí)驗材料

牛二型膠原(北京博蕾德技術(shù)發(fā)展有限公司,20022

CFA (北京博蕾德技術(shù)發(fā)展有限公司,7008


二、實(shí)驗方法

1、將牛二型膠原溶于0.05M醋酸中,終濃度2-4mg/ml,溫和攪拌,4℃過(guò)夜。

2、將牛二型膠原醋酸溶液與CFA等量混合并乳化,乳化使用高速攪拌器,冰浴攪拌CFA和膠原溶液,一般攪拌3次,30000rpm/3min。保證乳化液滴入水中成團不散開(kāi)。

3、初次免疫:小鼠尾根注射0.1ml乳液。從尾根部2cm處插入針頭,針尖距離尾根0.5cm注射。

4、二次免疫:第21天,小鼠尾根再次注射0.1ml乳液。從尾根部2cm處插入針頭,針尖距離尾根0.5cm注射。

5、一般在二次免疫后7-12天,模型組小鼠80%以上會(huì )出現關(guān)節炎癥狀。根據小鼠關(guān)節紅腫程度和活動(dòng)狀態(tài)進(jìn)行臨床評分。在實(shí)驗前和實(shí)驗后的第3、5、7、12天分別觀(guān)察記錄。

評分標準:

得分

發(fā)病情況

0

正常

1

腳部皮膚發(fā)紅,無(wú)明顯腫脹

2

輕度的踝關(guān)節、腕關(guān)節發(fā)紅、腫脹

3

踝關(guān)節或腕關(guān)節中度發(fā)紅腫脹

4

腳趾及關(guān)節紅腫嚴重,強直或畸形

 

三、實(shí)驗結果

圖片1_wm.jpg

圖片2_wm.jpg

 


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