動(dòng)物模型構建平臺

膿毒癥動(dòng)物模型構建方法總結

膿毒癥：

是一種嚴重的全身性炎癥反應綜合征，是由感染引起的機體免疫系統過(guò)度激活和炎癥反應失控的疾病。免疫系統反應過(guò)于激烈，導致炎癥反應泛濫，從而引發(fā)全身性炎癥反應綜合征。

常見(jiàn)膿毒癥造模方法：

1.細菌感染：通過(guò)注射細菌或其產(chǎn)生的細菌毒素來(lái)誘導膿毒癥模型。常用的細菌包括大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等。

2.LPS誘導：脂多糖（LPS）是細菌外膜中的主要成分，具有強烈的免疫激活作用?？梢酝ㄟ^(guò)注射LPS來(lái)誘導炎癥反應和膿毒癥模型。常用的給藥途徑包括靜脈注射、腹腔注射或氣道暴露。

3.盲腸結扎穿刺（CLP）：腹膜炎攻擊方法的一種，主要是通過(guò)手術(shù)方式將小鼠自身盲腸內容物釋放到腹腔造成感染，從而構建膿毒癥模型。

造模方法步驟

一、.盲腸結扎穿刺法（CLP）：

  1.實(shí)驗開(kāi)始前禁食不禁水12h，小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉，待小鼠完全麻醉后仰臥位固定。

  2.對腹部噴酒精和碘伏消毒，去除腹部表面毛發(fā)，使用手術(shù)刀在腹壁切2cm切口，暴露盲腸，在回盲瓣遠端結扎盲腸，然后用針刺穿刺盲腸2次，輕輕擠壓盲腸，使少量的腸內容物滲出，將盲腸復位，縫合腹膜和皮膚。

  3.小鼠正常飼養6h后皮下注射30ml/kg生理鹽水和30mg/kg的頭孢曲松。

二、LPS誘導法 :

  1.大鼠用卵圓鑷夾住其頸背部皮膚令其懸空，下腹部消毒。

  2.緩慢腹腔注射內毒素（大腸桿菌脂多糖，LPS，8-10 mg/kg，即230-250g的大鼠，每只注射2-2.5mg，約存活5-7天）制成大鼠膿毒癥模型。

  3.造模后大鼠出現精神倦怠，躁動(dòng)，呼吸、心率加快，腹脹，口鼻腔分泌物增多，豎毛，直腸溫度變化超過(guò)1℃等表現則視為造模成功。

結果案例

HE染色鏡下可見(jiàn)control組腸絨毛形態(tài)結構完整，未見(jiàn)出血

LPS組腸黏膜固有層下出血嚴重，可見(jiàn)炎細胞浸潤

IL-9組腸黏膜固有層下出血嚴重，肌層可見(jiàn)炎細胞浸潤