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八臂迷宮-行為學(xué)實(shí)驗

 

一、實(shí)驗概述
八臂迷宮(radial arm maze)實(shí)驗是最為常用的評價(jià)動(dòng)物學(xué)習記憶能力的模型之一,由Olton等人于20世紀70年代中期建立。其基本依據是,控制進(jìn)食的動(dòng)物受食物的驅使對迷宮各臂進(jìn)行探究,經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的訓練,動(dòng)物可記住食物在迷宮中的空間位置。該方法可同時(shí)測定動(dòng)物的工作記憶(working memory)和參考記憶(reference memory)。八臂迷宮操作簡(jiǎn)便、可行,而且能區分短期的工作記憶和長(cháng)期的參考記憶,現已被廣泛用于學(xué)習記憶功能評價(jià)。
二、實(shí)驗儀器

 

三、實(shí)驗指標

區域

指標

開(kāi)臂1

停留時(shí)間、活動(dòng)路程、進(jìn)入次數、潛伏期、平均速度(X軸投影速度)

開(kāi)臂2

停留時(shí)間、活動(dòng)路程、進(jìn)入次數、潛伏期、平均速度(X軸投影速度)

開(kāi)臂3

停留時(shí)間、活動(dòng)路程、進(jìn)入次數、潛伏期、平均速度(X軸投影速度)

其他臂

停留時(shí)間、活動(dòng)路程、進(jìn)入次數、潛伏期、平均速度(X軸投影速度)

四、實(shí)驗方法及應用
1) 動(dòng)物適應實(shí)驗環(huán)境1周后,稱(chēng)重,禁食24小時(shí)。此后每天訓練結束后限制性地給予正常食料(據體重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g),以使體重保持在正常進(jìn)食大鼠的80%~85%。
2) 第二天,迷宮各臂及中央區分撒著(zhù)食物顆粒(每只4~5粒,直徑約3~4mm)。然后,同時(shí)將4只動(dòng)物置于迷宮中央(通往各臂的門(mén)打開(kāi))。讓其自由攝食、探究10min。
3) 第三天,重復第二天的訓練。這一過(guò)程讓動(dòng)物在沒(méi)有很強的應激條件下熟悉迷宮環(huán)境。
4) 第四天起,動(dòng)物單個(gè)進(jìn)行訓練:在每個(gè)臂靠近外端食盒處各放一顆食粒,讓動(dòng)物自由攝食。食粒吃完或10min后將動(dòng)物取出。
5) 第五天,將食物放在食盒內,重復前一天的訓練,一天2次。
6) 第六天以后,隨機選4個(gè)臂,每個(gè)臂放一顆食粒;各臂門(mén)關(guān)閉,將動(dòng)物放在迷宮中央;30s后,臂門(mén)打開(kāi),讓動(dòng)物在迷宮中自由活動(dòng)并攝取食粒,直到動(dòng)物吃完所有4個(gè)臂的食粒。如經(jīng)10min食粒仍未吃完,則實(shí)驗終止。每天訓練兩次,其間間隔1h以上。

五、注意事項
1.  小鼠放射迷宮設備和實(shí)驗程序與大鼠類(lèi)似,但迷宮規格應比大鼠迷宮小,以免增加小鼠行為操作難度。
2.  本實(shí)驗也可只用來(lái)測定工作記憶。方法中唯一不同的是,在所有放射臂均放置食粒,而不是只選4個(gè)臂放置食粒。
3.  慢性應激對動(dòng)物的迷宮操作可產(chǎn)生影響,且存在性別差異。經(jīng)過(guò)慢性應激以后,雄性大鼠記憶力減弱,表現為記憶錯誤頻率增加;雄性大鼠的空間記憶反而增強,表現為錯誤頻率減少。
4.  即使在限制進(jìn)食條件下,也應讓大鼠體重每周增加5g,以免動(dòng)物因營(yíng)養不良而患病。剔除身體狀態(tài)不良的動(dòng)物。
5.  迷宮周?chē)娜魏我患锲肪杀粍?dòng)物用來(lái)作為空間定為的標志。去除或移動(dòng)這些標志可能使動(dòng)物操作困難并降低迷宮臂選擇的準確性。
6.  八臂迷宮實(shí)驗方法根據實(shí)驗目的的不同迷宮放射臂的數目可不同,包括8、16、24、32、40和48臂迷宮。迷宮臂越少要求動(dòng)物記住探究過(guò)的臂也越小,動(dòng)物的行為操作就越簡(jiǎn)單。增加臂的數目一方面增加了對動(dòng)物空間記憶的要求,另一方面也引入了更多的、有必要考慮的干擾因素(例如過(guò)去的迷宮學(xué)習對目前所測記憶的影響)。所以,通常使用8臂放射迷宮,既可減少不必要的、過(guò)多臂的干擾,又可縮短訓練和測試所花的時(shí)間。
7.  所用食物通常為小塊的、帶巧克力味(動(dòng)物最喜歡的味道之一)或甜味的早餐圈(每塊10mg);也可用液體食物(如巧克力奶或水)。后者對于測試某些影響動(dòng)物對固體食物吞咽的藥物尤為實(shí)用。
8.  影響動(dòng)物迷宮操作主要有兩大因素:對迷宮或觀(guān)察者的恐懼與動(dòng)物探究習性和已知放在迷宮臂內食物的驅使??謶忠蛩剡^(guò)強會(huì )阻止動(dòng)物的迷宮操作,使動(dòng)物始終停留在迷宮的某一個(gè)地方而不去探究。缺乏對食物的渴求也會(huì )產(chǎn)生類(lèi)似結果,增加對動(dòng)物的撫摸,必要時(shí)加高迷宮臂的側墻,有助于減少動(dòng)物的恐懼。如食物的驅使作用不足,可減少食物量,但必須同時(shí)監測體重和一般身體狀況。通常大鼠體重不應低于禁食前的80%;對多數大鼠,體重降低15%即可。
9.  與水迷宮不同,放射臂迷宮適合反復測試或長(cháng)期記憶的測試。一般認為,工作記憶代表短期記憶,參考記憶代表長(cháng)期記憶。

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