動(dòng)物模型構建平臺

肝硬化動(dòng)物模型

選體重150-200g的Wistar大鼠，將D-氨基半乳糖配制成10％的生理鹽水溶液，用1NNaOH將pH調節至7.0,以250mg/kg的劑量行腹內注射，每天一次，每周６天，約半年左右即可形成肝硬化。
 
  在復制過(guò)程中，自股動(dòng)脈取血作肝功能試驗，包括血清蛋白測定、濁度試驗、轉氨酶、乳酸脫氫酶（LDH）、單胺氧化酶(MAO)、５'-核苷酸酶(5'-NA)、γ-谷氨酰轉肽酶(γ－GT)及膽鹼酯酶。分批處死動(dòng)物進(jìn)行尸解，觀(guān)察腹水，心、肝、脾、肺腎等器官形態(tài),用4％甲醛溶液固定,石蠟包埋,切片厚5微米,進(jìn)行HE染色、網(wǎng)狀纖維（Gordon與Sweet法)、膠原纖維（Van Gieson 法)及彈力纖維(Weiger法)染色。

   在采用上述劑量D-氨基半乳糖長(cháng)期多次注入大鼠腹腔時(shí)，動(dòng)物耐受性較好。逐漸出現進(jìn)食活動(dòng)減少，有時(shí)解稀糖大便，腹部較為膨隆。半年內與對照組相比，實(shí)驗組體重平均增長(cháng)顯著(zhù)延緩。
 
  尸檢時(shí)可見(jiàn)腹腔內有腹水，0-20ml不等。心、脾、肺、腎、無(wú)明顯改變。與對照組相比，早期肝明顯增大、重量增加，色澤較灰黃，以后體積逐漸縮小，質(zhì)地變硬，邊緣較鈍，肝表面可見(jiàn)彌漫性分布的細顆粒狀結節，結節大小不一，直徑約為0.5-1.5mm,結節間可見(jiàn)彌漫分布的纖維間隔，間隔一般較細小，其凹凸程度隨病變而加深。切片HE染色、光鏡下檢查，在注射氨基半乳糖5個(gè)月后，肝小葉結構開(kāi)始紊亂,形成大小不等的肝細胞團，有的仍見(jiàn)好的中央靜脈，但其周?chē)T(mén)脈區膽管上皮高度增生，其間夾有殘留的個(gè)別肝細胞及少量單核多核白細胞及褐色素沉著(zhù)。隨著(zhù)病程的延長(cháng)，增生的膽管及纖維母細胞向四周呈星芒狀伸展，有的與中央靜脈相連。一般肝細胞變性壞死少見(jiàn)，大多呈增生表現。Gordon與Sweet 法染色顯示肝細胞團中網(wǎng)狀纖維少見(jiàn)而周?chē)M織中存在著(zhù)大量疏松的網(wǎng)狀纖維。膠原纖維及彈性纖維均未見(jiàn)增多。除肝外，其余實(shí)質(zhì)器官切片無(wú)異常發(fā)現。
 
 實(shí)驗動(dòng)物模型在出現肝硬化時(shí)血清白蛋白含量稍有降低,濁度試驗略增高,血清GPT、LDH、MAO、5'-NA、γ-GT與膽鹼脂酶均無(wú)明顯改變。