江蘇省南京市棲霞區和燕路371號 東南大學(xué)國家大學(xué)科技園科創(chuàng )樓A301
高效液相色譜是色譜法的一個(gè)重要分支,以液體為流動(dòng)相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測,從而實(shí)現對試樣的分析。
應用范圍:中藥(復方)中相關(guān)成分的含量測定、中藥(復方)指紋圖譜、血漿、尿液等生物樣品中相關(guān)成分的檢測。
實(shí)驗流程:
1、樣品前處理:
(a)中藥樣品:將中藥樣品使用溶劑溶解后,12000 r·min-1離心5 min。取上清液進(jìn)樣分析;
(b)血漿(血清)、尿液:取一定體積的樣品,進(jìn)行蛋白沉淀(甲醇、乙腈等)、液-液萃?。ㄒ宜嵋阴?、乙醚等),渦旋振搖3 min,12000 r·min-1離心5 min。取上清液,氮氣流吹干,復溶,12000 r·min-1離心5 min,取上清液進(jìn)樣分析。
(c)糞便或其他組織樣品:將糞便或其他組織樣品勻漿后,參照(b)進(jìn)行處理
2、色譜條件優(yōu)化:
(a)更換流動(dòng)相:改變有機相(甲醇/乙腈)-緩沖鹽(不同比例的甲酸、磷酸)的比例,從而使得不同分析物在色譜柱上分離,同時(shí)保持良好的峰形。
(b)更換波長(cháng):通過(guò)全波長(cháng)掃描結合不同分析物的特性,選擇最佳檢測波長(cháng),使得分析物的檢測靈敏度最佳。
(c)更換色譜柱:針對不同種類(lèi)的分析物,使用不同類(lèi)型的色譜柱,使得分析物在色譜柱上有良好的保留,同時(shí)分離度良好(R≥1.5)。
3、方法學(xué)確證:針對不同的檢測項目(中藥含量測定、生物樣品中的藥物檢測等),依據不同的相關(guān)法律、法規,對精密度、準確度、穩定性、線(xiàn)性等方法學(xué)項目進(jìn)行確證,保證檢測結果的準確性、可信性、重復性。
4、檢測及數據分析。
服務(wù)說(shuō)明及結果:
1.客戶(hù)提供:
藥品:中藥提取液、中藥凍干粉等
血漿或血清:大于100 μL(需提供一定體積的空白血漿)
尿液:大于500 μL(需提供一定體積的空白尿液)
糞便或其他組織樣品:10~100 mg
2.公司提供:基本實(shí)驗步驟、樣品前處理、檢測結果、數據處理過(guò)程及原始數據。
3.實(shí)驗周期:25~30個(gè)工作日。
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