PBMC 簡(jiǎn)介
英文全稱(chēng)：Peripheral blood mononuclear cell
外周血單個(gè)核細胞，指外周血中具有單個(gè)核的細胞。
包含淋巴細胞、單核細胞（monocyte）、樹(shù)突狀細胞和其它少量細胞（造血干細胞等）。
原 理
外周血各種血細胞的密度不盡相同，利用淋巴細胞分層液（Ficoll）作密度梯度離心，使一定比重的細胞群按相應密度梯度分布，從而將各種血細胞加以分離。
實(shí)驗步驟：
1.采血，稀釋?zhuān)ㄍ庵苎合♂屢?PBS/RPMI-1640=1：2）；
2.在離心管中加入 Ficoll，沿傾斜的管壁緩緩加入稀釋的外周血（Ficoll：稀釋血=1：
2）；
3.20℃，1500r/min，離心 30min；
4.輕輕吸取 PBMC 層移入另一試管中；
5.加足量稀釋液充分洗滌，1800 r/min 離心 10min ，棄上清。
6.加足量稀釋液充分洗滌，1800 r/min 離心 5min ，棄上清。
7.加凍存液（約 1.5ml），分裝至 3 小瓶，每瓶約 0.5ml，-80 保存。
分離全血中的 PBMC 注意事項：
1 每毫升外周血液大約可獲 1×106 單個(gè)核細胞；
2 Ficoll 應適量，外周血應充分稀釋?zhuān)瑴囟戎苯佑绊懙?Ficoll 的比重和分離效果；
3 在 Ficoll 上加入稀釋外周血時(shí)，應緩慢加，以免沖散界面；
4 吸取單個(gè)核細胞層時(shí)，應避免吸出過(guò)多的上清液或分層液而導致血小板污染。
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