江蘇省南京市棲霞區和燕路371號 東南大學(xué)國家大學(xué)科技園科創(chuàng )樓A301
動(dòng)物試驗評價(jià)輔助改進(jìn)記憶功能的方法
1 測試項目
1.1 動(dòng)物試驗
1.1.1 體重
1.1.2 被動(dòng)行為測試:平臺跳躍測試、避暗測試
1.1.3 主動(dòng)行為測試:梭箱測試、水迷宮測試、莫里斯水迷宮測試
2 測試原理
2.1 動(dòng)物試驗和人體食品試驗為必填項目。
2.2 動(dòng)物實(shí)驗強調被動(dòng)行為測試和主動(dòng)行為測試相結合,保證實(shí)驗結果的可靠性。
2.3 動(dòng)物實(shí)驗至少選擇3個(gè)實(shí)驗,被動(dòng)行為實(shí)驗和主動(dòng)行為實(shí)驗各至少選擇1個(gè)實(shí)驗。
2.4 選擇正常動(dòng)物和記憶障礙模型動(dòng)物之一。
2.5 動(dòng)物實(shí)驗應重復一次(重新飼養動(dòng)物,重復實(shí)驗)。
3 實(shí)驗方法
3.1 動(dòng)物選擇
建議使用近交系小鼠、斷奶小鼠或成年小鼠(18-22g)。用于提高老年人記憶力的產(chǎn)品必須使用成年小鼠,單性,每組10-15只。必須對供試品對正常小鼠記憶力(或條件反射)的影響和供試品對記憶障礙模型小鼠(或條件反射)的影響進(jìn)行實(shí)驗。
3.2 動(dòng)物實(shí)驗
3.2.1 跳臺實(shí)驗
反應箱底部覆蓋有36v電的銅網(wǎng)。當動(dòng)物受到電擊時(shí),它們的正常反應是跳到盒子里的絕緣平臺上,以免受傷。刺激。大多數動(dòng)物可能會(huì )再次或多次跳到銅柵上,然后在受到電擊后迅速跳回平臺。訓練進(jìn)行5分鐘,記錄每只鼠標觸電次數或錯誤次數,作為學(xué)習成績(jì)。 24h或48h重復測試,這就是記憶保留測試。記錄電擊動(dòng)物的數量、第一次跳下平臺的潛伏期、3min 8soCfP12Ph19mi914zQaZz2KsGGtcANVhVVfKAnmVRqM
3.2.2 避暗法
利用老鼠喜歡黑暗的習慣設計了一個(gè)設備,一半在暗室,一半在亮室,有一個(gè)小孔相連,暗室底部覆蓋通電銅網(wǎng),并連接定時(shí)器,可自動(dòng)記錄潛伏期。老鼠進(jìn)入暗室受到電擊,計時(shí)自動(dòng)停止。
3.2.3 穿梭箱實(shí)驗(雙向避讓實(shí)驗)
光(或聲音)和電擊相結合,刺激實(shí)驗動(dòng)物從被動(dòng)回避中建立主動(dòng)條件反射。記錄這種條件反射建立過(guò)程中的主動(dòng)回避反應指數,可以反映實(shí)驗動(dòng)物學(xué)習記憶能力的變化。
3.2.4 水迷宮實(shí)驗
動(dòng)物有“探索”和“替代”的傾向。離開(kāi)一只手臂時(shí),他們總是跑到“很久”沒(méi)有跑過(guò)的“新”手臂。老鼠不愿意在水里,所以他們尋找臺階爬出水面。訓練后,老鼠可以記住找到步驟的路線(xiàn)。
4 動(dòng)物試驗結果的確定
兩項被動(dòng)行為測試(跳臺測試、避暗測試)中任意一項為陽(yáng)性,主動(dòng)行為測試(穿梭箱、水迷宮、莫里斯水迷宮測試)三項實(shí)驗結果為陽(yáng)性,并且重復實(shí)驗的結果一致(同一實(shí)驗重復的兩次結果均為陽(yáng)性),可以確定該測試樣品有助于改善動(dòng)物實(shí)驗的記憶功能為陽(yáng)性。