RT-PCR,QRT-PCR,real-timePCR之間有什么區別?
關(guān)鍵詞: pcr 基因檢測 檢測 pcr實(shí)驗室 pcr技術(shù) 熒光定量pcr 第三方檢測中心 分子生物學(xué)
PCR:一種快速的DNA復制方法,由變性--退火(復性)--延伸三個(gè)基本反應步驟構成。
RT-PCR:反轉錄baiPCR(reverse transcription-PCR),是聚合酶鏈式反應(PCR)的一種廣泛應用的變形。在RT-PCR中,一條RNA鏈被逆轉錄成為互補DNA(cDNA),再以此為模板通過(guò)PCR進(jìn)行DNA擴增。
QRT-PCR在RT-PCR體系中同時(shí)加入內參標基因的引物,使目的基因和內參基因在同一條件下同時(shí)擴增。在擴增反映結束之后,可以通過(guò)凝膠電泳的方法對擴增產(chǎn)物進(jìn)行半定量分析,但分析的是PCR終產(chǎn)物,不能準確分析未經(jīng)PCR信號放大之前的起始模板量。
real-time PCR:實(shí)時(shí)PCR(real-time PCR)屬于定量PCR(Q-PCR)的一種,以一定時(shí)間內DNA的增幅量為基礎進(jìn)行DNA的定量分析。
Real-timePCR與reverse transcription PCR相結合,能用微量的RNA來(lái)找出特定時(shí)間細胞組織內的特別表達的遺傳基因。這兩種RT PCR的組合又被稱(chēng)之為定量RT-PCR(QRT-PCR)。
擴展資料:
聚合酶鏈式反應是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA復制,PCR的最大特點(diǎn),是能將微量的DNA大幅增加。
PCR(聚合酶鏈式反應)是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì )變成單鏈,低溫(經(jīng)常是60°C左右)時(shí)引物與單鏈按堿基互補配對的原則結合,再調溫度至DNA聚合酶最適反應溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著(zhù)磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈?;诰酆厦钢圃斓腜CR儀實(shí)際就是一個(gè)溫控設備,能在變性溫度,復性溫度,延伸溫度之間很好地進(jìn)行控制。