藥效學(xué)實(shí)驗中心

輔助降血脂功能評價(jià)方法

1 實(shí)驗項目

1.1 混合型高脂血癥動(dòng)物模型

1.1.1 原理：用含膽固醇、蔗糖、豬油、膽酸鈉的飼料喂養動(dòng)物，可形成脂代謝紊亂動(dòng)物模型，然后給予動(dòng)物試驗樣品，可檢測試驗樣品對高脂血癥的影響，并可確定脂質(zhì)的吸收，脂蛋白的形成，以及測試樣品或排泄物對脂質(zhì)的降解。

1.1.2 試驗方法：SPF級SD雄性大鼠，體重180～220g，每組8～12只。在屏障系統下，給大鼠喂食維持性飼料5-7天。根據體重隨機分為2組，10只大鼠給予維持飼料作為空白對照組，40只大鼠給予模型飼料作為模型對照組。每周稱(chēng)一次體重。模型對照組給予模型飼料1～2周后，空白對照組和模型對照組大鼠不禁食采血，采血后盡快分離血清，測定血清TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量。根據TC水平，模型對照組隨機分為4組。分組后空白對照組與模型對照組的TC、TG、LDL-C、HDL-C差異無(wú)統計學(xué)意義。分組后，三個(gè)劑量組每天口服試驗樣品，空白對照組和模型對照組同時(shí)給予等體積的相應溶劑，空白對照組繼續給予維持飼料，繼續給模型對照組和三個(gè)劑量組喂模型飼料，定期稱(chēng)體重。在實(shí)驗結束時(shí)，在不禁食的情況下采集血液。采血后盡快分離血清，測定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。

1.2 高膽固醇血癥動(dòng)物模型

1.2.1 原理：用含有膽固醇、豬油和膽酸鈉的飼料喂養動(dòng)物，可以形成高膽固醇血癥和脂代謝紊亂的動(dòng)物模型，然后給動(dòng)物一個(gè)試驗樣品，可以檢測試驗樣品對高膽固醇血癥的影響，并可以確定測試樣品對脂質(zhì)吸收、脂蛋白形成、脂質(zhì)降解或排泄的影響。

1.2.2 動(dòng)物試驗方法：SPF級SD雄性大鼠，體重180-220g，每組8-12只僅有的。在屏障系統下，給大鼠喂食維持性飼料5-7天。根據體重隨機分為2組，10只大鼠給予維持飼料作為空白對照組，40只大鼠給予模型飼料作為模型對照組。模型對照組給予模型飼料后1-2周，空白對照組和模型對照組動(dòng)物不禁食采血，采血后盡快分離血清，檢測測定血清TC、TG、LDL-C和HDL-C。模型對照組按TC水平隨機分為4組。分組后空白對照組與模型對照組的TC、TG、LDL-C、HDL-C比較差異無(wú)統計學(xué)意義（P>0.05）。分組后，三個(gè)劑量組每天口服試驗樣品，空白對照組和模型對照組同時(shí)給予等體積的相應溶劑，空白對照組繼續給予維持飼料，模型對照組和三個(gè)劑量組繼續給予模型。采血后盡快分離血清，測定血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平。

2 實(shí)驗原理

2.1 動(dòng)物實(shí)驗和人體食品試驗所列指標均為強制性項目。

2.2 根據供試品的作用機制，可選擇兩種動(dòng)物模型中的一種進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗。

2.3 根據測試樣品的作用機理，可選擇人體食品測試的三種方案之一。

2.4 進(jìn)行人體食品試驗時(shí)，應進(jìn)一步觀(guān)察被測樣品的食用安全性。

3 結果判斷

3.1 動(dòng)物實(shí)驗：

3.1.1 混合型高脂血癥動(dòng)物模型

輔助降血脂功能結果判斷：模型對照組與空白對照組比較，血清甘油三酯升高，血清總膽固醇或低密度脂蛋白膽固醇升高，差異有顯著(zhù)性意義，建立判斷模型。 (1)各劑量組與模型對照組比較，各劑量組血清總膽固醇或低密度脂蛋白膽固醇均降低，血清甘油三酯降低，差異均有統計學(xué)意義。密度脂蛋白膽固醇不明顯低于模型對照組，可以確定供試品有助于降低具有降血脂功能的動(dòng)物實(shí)驗結果為陽(yáng)性。 (2)各劑量組與模型對照組相比，各劑量組血清總膽固醇或低密度脂蛋白膽固醇均降低，差異有統計學(xué)意義。同時(shí)，各劑量組血清甘油三酯均不顯著(zhù)高于模型對照組。給藥組血清高密度脂蛋白膽固醇與模型對照組相比無(wú)顯著(zhù)降低，在具有輔助降低血清膽固醇作用的動(dòng)物實(shí)驗中，可判斷供試樣品為陽(yáng)性。 (3)各劑量組與模型對照組比較，各劑量組血清甘油三酯均降低，差異有統計學(xué)意義。高密度脂蛋白膽固醇與模型對照組相比沒(méi)有明顯降低，可以確定供試品在輔助降低血清甘油三酯功能的動(dòng)物實(shí)驗中具有陽(yáng)性結果。

3.1.2 高膽固醇血癥動(dòng)物模型

模型對照組與空白對照組比較，血清總膽固醇（TC）或低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）升高，血清甘油三酯（TG）差異不顯著(zhù)，建立判斷模型。各劑量組與模型對照組比較，各劑量組血清總膽固醇或低密度脂蛋白膽固醇均降低，且差異有顯著(zhù)性，各劑量組血清高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）并沒(méi)有顯著(zhù)低于模型控制。組，血清甘油三酯未顯著(zhù)高于模型對照組，可以確定供試品輔助降低血清膽固醇功能的動(dòng)物實(shí)驗結果為陽(yáng)性。