江蘇省南京市棲霞區和燕路371號 東南大學(xué)國家大學(xué)科技園科創(chuàng )樓A301
保健品促進(jìn)消化功能的動(dòng)物實(shí)驗評價(jià)方法
1 實(shí)驗項目
1.1 實(shí)驗原理
胃腸道是攝取、消化和吸收營(yíng)養物質(zhì)的器官,食物的消化主要靠它的運動(dòng),消化靠的是酶的分泌。如果某種保健食品能調節這個(gè)環(huán)節或幾個(gè)環(huán)節,那么它可能具有促進(jìn)消化功能的作用。
1.2 體重、增重、攝食量和食物利用
選擇相同性別的大鼠。動(dòng)物體重的變化不應超過(guò)實(shí)驗開(kāi)始時(shí)平均體重的 10%。分為不同劑量的實(shí)驗組和陰性對照組,口服供試品,每周兩次測量體重和攝食量。在實(shí)驗結束時(shí)計算體重、體重增加、食物攝入和食物利用。
1.3 小腸運動(dòng)實(shí)驗
SPF級小鼠,單性,18-22g。檢疫合格后隨機分為不同劑量的實(shí)驗組、空白對照組和模型對照組。供試品灌胃給藥,實(shí)驗結束前禁水20小時(shí)。測定當天各實(shí)驗組、空白組和模型對照組再給予供試品或蒸餾水,30分鐘后各實(shí)驗組和模型對照組給予復方地芬諾酯5~6mg/kgbw,給予蒸餾水空白對照組30分鐘后給各組灌墨,25分鐘后脫頸處死動(dòng)物,計算墨液推進(jìn)率。
1.4 消化酶的測定
SPF級大鼠,單性,180-220g。檢疫合格后按不同劑量分為實(shí)驗組和陰性對照組。實(shí)驗開(kāi)始時(shí)動(dòng)物體重的差異不應超過(guò)平均體重的10%。測試樣品通過(guò)胃內給藥給予。實(shí)驗結束前,各組動(dòng)物禁食24小時(shí),乙醚麻醉大鼠幽門(mén)結扎術(shù)收集一定時(shí)間內排出的胃液,測定單位時(shí)間內胃液量.取1mL胃液置于50mL錐形瓶中,加入15mL 0.05mol/L鹽酸溶液并搖勻,分別置于兩個(gè)新制蛋白管中。塞緊瓶口,37℃培養箱孵育24小時(shí),取出蛋白管,用尺子測量蛋白管兩端透明部分的長(cháng)度(mm),計算四次的平均值結束.計算胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排泄。
2 動(dòng)物試驗結果的判斷
動(dòng)物體重、增重、攝食量、食物利用率、小腸動(dòng)力試驗、消化酶試驗三方面中任意兩項為陽(yáng)性,則可判斷供試樣品有助于促進(jìn)消化功能的動(dòng)物試驗結果為陽(yáng)性。